L-3000四元低壓自動進(jìn)樣高(gāo)效(xiào)液(yè)相色譜用(yòng)於(yú)研(yán)究(jiū)蛋(dàn)白質(zhì)的(dí)結構動力(lì)學和(hé)構型(xíng)變化(huà),可(kě)更(gēng)好地確(què)定(dìng)它們的高(gāo)級(jí)結構(gòu)。氘(dāo)是(shì)氫(qīng)的一種重同(tóng)位素(sù),因(yīn)此可以通過質譜(pǔ)對氘含(hán)量(liáng)進行測(cè)量或“稱(chēng)重”。
科(kē)學家(jiā)們使(shǐ)用HDX-MS研(yán)究(jiū)獲得的信(xìn)息對不(bù)同“狀態”的(dí)蛋(dàn)白(bái)質高級結構進(jìn)行對比,如對比與候選藥物(wù)結(jié)合(hé)前(qián)和(hé)與(yǔ)結(jié)合後的構(gòu)型(xíng)變(biàn)化(huà),定位藥物結(jié)合部位和結合(hé)的強弱。通過計算和(hé)比較氘交換水平的差(chà)別(bié)來獲得蛋白質構(gòu)型(xíng)變化的(dí)信息。HDX-MS能(néng)夠(gòu)在溶(róng)液中監測蛋白結合域相(xiāng)互作(zuò)用情況(kuàng),蛋白(bái)質(zhì)結合(hé)動力學,配體結合(hé)以(yǐ)及(jí)蛋(dàn)白(bái)質(zhì)折(zhē)疊(dié)等相關研究(jiū)。
HDX-MS研(yán)究需(xū)要對蛋白質構型(xíng)的(dí)微小變化進(jìn)行(háng)檢測,高效(xiào)率的色譜分離(lí)對(duì)達到高品(pǐn)質的數據結(jié)果至(zhì)關重要(yào)。ACQUITY UPLC M-Class係(xì)統(tǒng)更高(gāo)的耐(nài)壓確保(bǎo)了能(néng)夠在0℃對(duì)酶(méi)切肽(tài)段快速(sù)進行LC分(fēn)離(lí)和質(zhì)譜(pǔ)檢測(cè)。全(quán)自動HDX-MS係(xì)統(tǒng)整合了HDX-MS的所(suǒ)有步(bù)驟,包括全自(zì)動(dòng)的(dí)氫氘交換樣(yàng)品製備(bèi)過程(chéng),蛋白(bái)質序(xù)列(liè)確定(dìng),氘(dāo)交換曲綫以及(jí)沃(wò)特世(shì)*的DyanmX HDX數(shù)據分析(xī)軟件(jiàn)。
同時發布(bù)的還有(yǒu)沃(wò)特(tè)世專門(mén)開發(fā)的用於用(yòng)於蛋(dàn)白質“在(zài)綫酶(méi)切(qiē)”的(dí)UPLC色(sè)譜柱,即Waters Enzymate BEH在綫Pepsin酶切柱,將(jiāng)HDX-MS效果(guǒ)提(tí)升(shēng)到一(yī)個新(xīn)高(gāo)度(dù)。ACQUITY UPLC M-Class係統與Waters SYNAPT G2-Si或(huò)Xevo G2-S QTof質譜儀聯用(yòng),提供(gōng)高(gāo)質(zhì)量的圖譜和數(shù)據,得到HDX-MS分析(xī)所(suǒ)需要(yào)的微(wēi)小質(zhì)量變化。將所有這(zhè)些(xiē)創(chuàng)新技(jì)術組(zǔ)合在一起,沃(wò)特(tè)世(shì)提供了完整的且(qiě)*的HDX-MS分(fēn)析平(píng)台。
L-3000四(sì)元低(dī)壓(yā)自(zì)動(dòng)進樣高效(xiào)液(yè)相(xiāng)色譜
對於(yú)復雜(zá)樣品(pǐn),特別是當(dāng)樣(yàng)品(pǐn)中的目標(biāo)組分如蛋白(bái)質(zhì),肽或小分(fēn)子(zǐ)的動態範圍很(hěn)寬時,二(èr)維LC是非(fēi)常(cháng)有(yǒu)用(yòng)的(dí)策略。利用此技(jì)術(shù)能夠(gòu)增加色(sè)譜峰容(róng)量(liáng),具體的(dí)操作(zuò)是先通過*維分離(lí)對蛋白或肽(tài)進(jìn)行分(fēn)組(zǔ),所得到的每一(yī)個(gè)餾分經(jīng)過富(fù)集(jí),再通過具有不同選擇(zé)性的(dí)第二維(wéi)色(sè)譜(pǔ)柱(zhù)進(jìn)行分(fēn)離。
ACQUITY UPLC M-Class係(xì)統采用直觀(guān)易(yì)用(yòng)的(dí)向導菜單進(jìn)行(háng)方法(fǎ)設置(zhì),標(biāo)準化(huà)的色(sè)譜柱(zhù)以及(jí)具有高(gāo)重現性(xìng)的(dí)色(sè)譜儀(yí)器有效(xiào)簡化了2D-LC分離(lí)。智(zhì)能化閥(fá)操作增加了樣(yàng)品通量,同(tóng)時(shí)zui大(dà)程度地提高(gāo)數據質量。
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